产品目录

土壤和湖海沉积物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸，它们对PCR等后续反应有极大的抑制作用，所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要环节，但是目前市场上没有专门的产品，针对这一情况，百奥莱博这个产品，专门用于对提取DNA用的土壤进行预处理，以清除腐殖酸成分。

• 清除效果好，一次能使腐殖酸的浓度降低50%左右。
  
• 适合于黄色、红色、黑色和棕黑色等各种质地的土壤和河海沉积物。
  
• 操作过程简单快速，一次处理只需要10分钟。
  
• 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。

• 按每1克土壤加10mL本产的比例将土壤样品与本制品混合。
  
• 震荡器上震荡3～5分钟。
  
• 3000～5000g室温离心5分钟，弃上清，沉淀的土壤可直接用于DNA提取。
  注意：此操作可以多次重复。具体次数取决于土壤中腐殖酸的浓度，一般每洗涤1次就可以取掉50%以上的腐殖酸，一般土壤洗涤1～3次即可。

• 如何判断提取的DNA没有腐殖酸污染？
  方法一是目测法，即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色，说明可能是少量残留的未除尽的腐殖酸。
  方法二是检测最大光吸收。
  注意：有腐殖酸污染并不表示DNA不能使用，有的腐殖酸并不抑制PCR扩增。
  
• 腐殖酸的最大吸收波长是多少？
  腐殖酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质，其结构千差万别，土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同，所以其最大吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的最大吸收波长在260nm，有的则在340nm，所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluka等公司出售的腐殖酸产品成分一般比较简单，其最大吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
  
• 是否腐殖酸都会抑制后续的DNA反应？
  否，因为腐殖酸是一大类物质的统称，他们的结构和特性各不相同，所以是否对后续反应有影响最好通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生，而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生，说明可能有抑制作用。
  
• 有什么有效方法去除DNA样品中的腐殖酸？
  可以先电泳，然后用超大片段胶回收试剂纯化DNA，还可以使用百奥莱博的柱式腐殖酸清除剂
  
• 在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时，为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现？
  这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取，提取过程中污染了E.coli的基因组DNA，而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版，所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。